Пробирки, микропробирки и криопробирки: какие выбрать для лаборатории

Казалось бы, что сложного – пробирка и есть пробирка. Но стоит заказать первые попавшиеся, и выясняется: одни не выдерживают центрифугирования, другие деформируются при автоклавировании, третьи пропускают загрязнение при хранении в −80 °C. Лабораторные пробирки – это не расходник одного типа, а целое семейство изделий с разными задачами. Разберёмся, какие виды пробирок существуют, чем они принципиально различаются и как выбрать нужный вариант под конкретную задачу.

Какие бывают лабораторные пробирки

Все пробирки для лаборатории можно разделить по нескольким признакам: назначению, материалу, конструкции крышки и форме дна. Каждый параметр влияет на пригодность изделия для конкретного метода работы.

По назначению выделяют несколько основных категорий:

• Серологические пробирки – стеклянные или пластиковые, без крышки или с пробкой, для работы с сыворотками крови и химическими реактивами.
• Центрифужные пробирки (фальконы) – конические, с завинчивающейся крышкой, объёмом 15 и 50 мл, для разделения смесей методом центрифугирования.
• Микропробирки типа Эппендорф – конические, 0,2–5 мл, для работы с микрообъёмами в молекулярной биологии, ПЦР, биохимии.
• Вакуумные пробирки – для забора крови; содержат антикоагулянт (ЭДТА, гепарин, цитрат натрия) или активатор свёртывания, запаяны под вакуумом.
• Криопробирки – для долгосрочной криоконсервации биологических образцов при −80 °C и ниже, вплоть до −196 °C в жидком азоте.
• Пробирки для ПЦР – 0,2 мл, тонкостенные, с плоской или куполообразной крышкой, сертифицированы на отсутствие ДНКаз, РНКаз и ингибиторов ПЦР.

Материалы изготовления

Выбор материала определяет химическую стойкость, диапазон рабочих температур и совместимость с методом стерилизации.

• Боросиликатное стекло – классика лабораторной практики. Химически инертно, прозрачно, выдерживает многократное автоклавирование. Используется для серологических пробирок, реакционных пробирок общего назначения и работы с агрессивными реагентами. Главный недостаток — хрупкость и недопустимость использования в ультрацентрифугах без специальных адаптеров.
• Кварцевое стекло — для работы с ультрафиолетом и при экстремально высоких температурах (до +1 000 °C). Применяется в спектрофотометрии и фотохимии. Значительно дороже боросиликатного.
• Полипропилен (ПП) — основной материал для пластиковых лабораторных пробирок. Полипропилен гарантирует высокую стойкость к химическим веществам, механическому воздействию и перепадам температур. Medams Выдерживает автоклавирование при +121 °C, устойчив к кислотам, щелочам и большинству органических растворителей. Применяется для микропробирок типа Эппендорф, центрифужных пробирок и криопробирок.
• Полистирол — прозрачный жёсткий пластик для одноразовых серологических пробирок и планшетов ИФА. Не выдерживает автоклавирования и не подходит для органических растворителей; температурный диапазон ограничен — до +70 °C.

Микропробирки: типы и применение

Микропробирка Эппендорф – один из самых узнаваемых форматов лабораторного пластика. Первые пробирки Eppendorf появились в 1963 году и быстро стали востребованы в биологических и медицинских лабораториях; уже к 1966 году было продано более одного миллиона таких пробирок. Сегодня название стало нарицательным – микропробирками «типа Эппендорф» называют любые конические пробирки с защёлкивающейся крышкой объёмом 0,5–5 мл.

Если вашей лаборатории необходимо качественные микропробирки купить, следует обратить внимание на следующие ключевые параметры:

• Объём. Стандартный ряд: 0,2 / 0,5 / 1,5 / 2,0 / 5,0 мл. Для ПЦР — строго 0,2 мл; для центрифугирования и хранения образцов — 1,5 или 2,0 мл.
• Максимальное ускорение при центрифугировании. Стандартные пробирки выдерживают 16 000–18 000g; специальные серии — до 30 000g.
• Форма дна. Коническое дно — для осаждения преципитата в виде компактной гранулы. Круглое дно — для инкубации и работы с малыми объёмами без потерь на углах.
• Тип крышки. Защёлкивающаяся крышка с замком Safe-Lock предотвращает случайное открывание при центрифугировании. Завинчивающаяся крышка — для длительного хранения образцов.
• Степень чистоты. Для молекулярной биологии критична сертификация на отсутствие ДНКаз, РНКаз и ингибиторов ПЦР. В 1992 году был сертифицирован стандарт Biopur, означающий высшую степень чистоты — отсутствие ДНК, АТФ, РНК, бактерий и реагентов.

Пробирки для ПЦР (0,2 мл) – отдельная группа. Тонкостенные, для равномерного теплообмена в термоциклере. Выпускаются в стрипах по 8 штук для удобства работы с 96-луночными форматами. Стерильность и апирогенность – обязательное требование для чистых молекулярно-биологических работ.

Криопробирки для хранения биообразцов

Криопробирка – это специализированный сосуд для долгосрочной криоконсервации. Изготавливается из полипропилена, стойкого к замораживанию и нагреванию, без критических деформаций в диапазоне температур от −196 до +121 °C. Применяются для хранения клеток, ДНК, РНК, белков, стволовых клеток, эмбрионов и спермы – как в низкотемпературных морозильниках (−80 °C), так и в криохранилищах на жидком азоте.

• Объём. Наиболее востребованы пробирки 1,2; 1,8; 2,0 и 5,0 мл. Под конкретные задачи выпускаются объёмы от 0,5 до 10 мл.
• Тип резьбы крышки – ключевой параметр выбора:

• Внешняя резьба: крышка закрывается вокруг горловины снаружи. Образец не оседает на витках резьбы при переливании в другие ёмкости. Такие пробирки удобнее в повседневной работе.
• Внутренняя резьба: крышка ввинчивается внутрь горловины, силиконовое уплотнительное кольцо обеспечивает дополнительную герметизацию. При погружении в жидкий азот криопробирки с внутренней резьбой и силиконовым кольцом снижают риск проникновения жидкого азота внутрь и последующего разрыва пробирки при размораживании.

• Форма дна. Круглое дно – универсально. Коническое – удобно для осадка. «Юбка устойчивости» или основание типа «звёздочка» позволяют пробирке стоять на столе без подставки – важно при работе с открытой крышкой.
• Маркировка. Большинство криопробирок имеют матовое поле для записей криостойким маркером. Для работы в биобанках и криохранилищах с тысячами образцов используются пробирки со штрихкодом — нанесённым или предустановленным.
• Хранение в жидком азоте. Важная деталь, о которой не все знают: рекомендуется хранить криопробирки в паровой фазе жидкого азота, а не погружать непосредственно в жидкость – это снижает риск проникновения азота внутрь и повреждения образцов. Для размещения в криохранилищах используются криоштативы.

Вакуумные пробирки для забора крови

Вакуумная пробирка – закрытая система для пробоотбора: кровь поступает самотёком за счёт разрежения внутри. Цвет крышки обозначает содержащий реагент:

• Красная / золотая – активатор свёртывания или гель-разделитель, для биохимии сыворотки.
• Фиолетовая (сиреневая) – ЭДТА, антикоагулянт для гематологии и молекулярных исследований.
• Синяя – цитрат натрия, для коагулограммы.
• Зелёная – гепарин, для биохимии плазмы.

Каждый антикоагулянт влияет на аналит: например, ЭДТА хелатирует кальций и не подходит для ионизированного кальция в плазме, а гепарин ингибирует ряд ферментативных реакций. Выбор вакуумной пробирки определяется протоколом анализа, а не предпочтением лаборанта.

Сравнение и критерии выбора

Какие пробирки использовать – быстрая подсказка

• ПЦР и молекулярная биология → микропробирки 0,2 и 1,5 мл, сертификат PCR clean / Biopur.
• Разделение фракций в объёмах 15–50 мл → центрифужные пробирки (фальконы).
• Забор крови для клинической диагностики → вакуумные пробирки нужного цвета.
• Хранение клеточного материала, ДНК, эмбрионов при −80 °C и ниже → криопробирки с внутренней резьбой и силиконовым уплотнителем.
• Долгосрочный биобанк с жидким азотом → криопробирки со штрихкодом и совместимые криоштативы.

Правила работы и хранения

Несколько практических моментов, которые влияют на результат:

• Автоклавирование полипропиленовых пробирок допустимо при +121 °C в течение 20 мин, но только для изделий, предназначенных для повторной стерилизации, – это указано в спецификации.
• Стерильность пробирок «по производству» (изготовлены в чистой зоне при +250 °C) не эквивалентна Biopur-сертификации – для работы с нуклеиновыми кислотами этого недостаточно.
• Градуировка на пробирке носит ориентировочный характер – для точного отмеривания объёмов используйте пипетку, а не риски на пластике.
• Маркируйте пробирки криостойким маркером или используйте распечатанные этикетки с защитным ламинированием: обычные надписи смываются при оттаивании.
• Апирогенные и стерильные пробирки вскрывайте непосредственно перед использованием; повторное закрытие нераспакованных изделий сохраняет их статус только при работе в ламинарном боксе.

Подобрать пробирки лабораторные нужного типа, объёма и степени чистоты для вашей задачи помогут специалисты litoplast.by. Оставьте заявку на сайте – вы получите консультацию по ассортименту и условиям поставки с учётом требований вашей лаборатории.